一、介 绍
本实验采用Waals™ RNA Pull-down Kit提供链霉亲和素磁珠与生物素标记的寡核苷酸结合;通过Waals™ RNA Ligation Kit提供的试剂将目的RNA与寡核苷酸连接,进而与样品蛋白孵育形成RNA-蛋白复合物,通过磁珠分离可高效富集与目的RNA相互作用的蛋白。通过Elution洗脱后可进行SDS-PAGE、银染、质谱、免疫印迹等分析。
Waals™ RNA Ligation Kit提供T4 RNA连接酶在特殊反应体系中将目的RNA与寡核苷酸连接。由于寡核苷酸已与磁珠结合,所以目的RNA不会与寡核苷酸混连,不会影响RNA的结构。试剂盒提供的方法可以获得稳定的RNA pull-dwon产物。
二、服务内容
RNA Pull-down assay包括三个部分:1. 体外转录获得RNA全长;2. 将RNA与磁珠上的寡核苷酸连接;3. 与蛋白质复合物共孵育进行RNA Pull-down assay,如图1所示。
一般情况下,实验需设置阴性对照和阳性对照,但大多数情况下可以只设置阴性对照,不影响文章发表。阴性对照主要是采用RNA的反义链。因此,本实验至少需要两组,即RNA反义链和RNA正义链两组。
RNA pull-down assay的产物可进行银染、质谱、免疫印迹等分析。
三、合同
双方达成协议之后会签订技术服务合同。【注】本实验服务保证实验的真实性,但不保证有阳性结果。